Odstavec předpisu 124/2001 Sb.
Vyhláška č. 124/2001 Sb., kterou se stanoví požadavky na odběr vzorků a principy metod laboratorního zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů a způsob uchovávání vzorků
Příl.18
Příl.18
Část 1:
Metody odběru vzorků pro odborný dozor a zkoušení obsahu dioxinů (PCDD/PCDF)
a určování dioxinům podobných PCB v některých krmivech
1. Účel a oblast působnosti
Vzorky určené pro úřední kontrolu obsahu dioxinů
(PCDD/PCDF), jakož i pro určení obsahu PCB s dioxinovým efektem (Tabulka PCB s dioxinovým
efektem) v krmivech se odebírají v souladu s § 1 až 6 této vyhlášky. Musí se použít
kvantitativní požadavky týkající se kontroly látek nebo produktů obsažených rovnoměrně
v krmivech v souladu s § 1 až 6 této vyhlášky. Takto získané souhrnné vzorky se považují
za reprezentativní pro vzorkované partie nebo subpartie, z nichž jsou odebrány. Dodržení
maximálních obsahů stanovených v příloze č. 3 vyhlášky č. 451/2000 Sb. se posuzuje
na základě obsahů stanovených v laboratorních vzorcích.
2. Soulad partie nebo subpartie se specifikací
Partie se uznává, jestliže
výsledek jediné analýzy nepřekročí příslušný maximální obsah stanovený v příloze
č. 3 vyhlášky č. 451/2000 Sb. při zohlednění nejistoty měření.
Partie nesplňuje maximální
obsah stanovený v příloze č. 3 vyhlášky č. 451/2000 Sb., jestliže výsledek analýzy
potvrzený druhou analýzou a vypočtený jako průměr nejméně dvou nezávislých stanovení
při zohlednění nejistoty měření překročí maximální obsah.
Nejistotu měření lze zohlednit
jedním z těchto způsobů: - započítáním rozšířené nejistoty při použití faktoru pokrytí
2, který odpovídá hladině spolehlivosti alespoň 95 %, nebo - stanovením rozhodovací
meze (CCa) v souladu s rozhodnutím Komise 2002/657/ES (bod 3.1.2.5. přílohy pro látky,
pro něž byla stanovena přípustná hodnota).
Tato pravidla se uplatní pro výsledek analýzy
získaný ze vzorku pro úřední kontrolu.
Tabulka PCB s dioxinovým efektem
----------------------------------------------------------------
Kongener Hodnota TEF Kongener Hodnota TEF
----------------------------------------------------------------
Dibenzo-p-dioxiny („PCDD“) PCB „s dioxinovým efektem“: non-
ortho PCB + mono-ortho PCB
----------------------------------------------------------------
2,3,7,8-TCDD 1
1,2,3,7,8-PeCDD 1 Non-ortho PCB
1,2,3,4,7,8-HxCDD 0,1
1,2,3,6,7,8-HxCDD 0,1 PCB 77 0,0001
1,2,3,7,8,9-HxCDD 0,1 PCB 81 0,0001
1,2,3,4,6,7,8-HpCDD 0,01 PCB 126 0,1
OCDD 0,0001 PCB 169 0,01
----------------------------------------------------------------
Dibenzofurany („PCDF“) Mono-ortho PCB
----------------------------------------------------------------
2,3,7,8-TCDF 0,1 PCB 105 0,0001
1,2,3,7,8-PeCDF 0,05 PCB 114 0,0005
2,3,4,7,8-PeCDF 0,5 PCB 118 0,0001
1,2,3,4,7,8-HxCDF 0,1 PCB 123 0,0001
1,2,3,6,7,8-HxCDF 0,1 PCB 156 0,0005
1,2,3,7,8,9-HxCDF 0,1 PCB 157 0,0005
2,3,4,6,7,8-HxCDF 0,1 PCB 167 0,00001
1,2,3,4,6,7,8-HpCDF 0,01 PCB 189 0,0001
1,2,3,4,7,8,9-HpCDF 0,01
OCDF 0,0001
----------------------------------------------------------------
Použité zkratky:
„T“ = tetra;
„Pe“ = penta;
„Hx“ = hexa;
„Hp“ = hepta; „O“ = okta;
“CDD“ = chlorodibenzo-p-dioxin;
„CDF“ = chlorodibenzofuran; „CB“ = chlorobifenyl.
----------------------------------------------------------------
Část 2:
Příprava vzorků a požadavky na metody analytického zkoušení používané při
provádění odborného dozoru a zkoušení obsahu dioxinů (pcdd/pcdf) a stanovení dioxinům
podobných pcb v některých krmivech
1.
Cíl a oblast použití
Tyto požadavky na metody analytického zkoušení se používají pro stanovení
dioxinů [polychlorovaných dibenzo-p-dioxinů (PCDD) a polychlorovaných dibenzofuranů
(PCDF)] a dioxinům podobných polychlorovaných bifenylů (PCB) v krmných surovinách
a krmivech.
Sledování přítomnosti dioxinů v krmivech se provádí pomocí strategie zahrnující
vyhledávací metodu pro výběr vzorků s obsahem dioxinů a dioxinům podobných PCB o
méně než 30 až 40 % nižším nebo vyšším než je množství, které je předmětem zájmu.
Koncentrace dioxinů ve vzorcích s významným obsahem se stanoví/potvrdí ověřovací
metodou.
Vyhledávací metody jsou metody, které se používají ke zjišťování přítomnosti
dioxinů a dioxinům podobných PCB v množství, které je předmětem zájmu. Tyto metody
jsou schopné rychle zpracovat velký objem vzorků a používají se k prověření velkého
množství vzorků z hlediska možných pozitivních výsledků. Jsou speciálně navrženy
tak, aby vyloučily falešně negativní výsledky.
Ověřovací metody jsou metody, které poskytují úplné nebo doplňkové informace
umožňující jednoznačnou identifikaci a kvantifikaci dioxinů a dioxinům podobných
PCB na uvažované úrovni, která je předmětem zájmu.
2.
Obecně
Protože vzorky z životního prostředí a biologické vzorky (včetně vzorků
krmných surovin/krmiv) obvykle obsahují složité směsi různých dioxinových kongenerů,
byla pro usnadnění hodnocení jejich nebezpečnosti vyvinuta koncepce koeficientů toxické
ekvivalence (TEF). Tyto TEF byly stanoveny, aby vyjádřily koncentraci směsí 2,3,7,8-substituovaných
PCDD a PCDF, a později také u některých non-ortho a mono-ortho-chlór substituovaných
PCB, které vykazují aktivitu podobnou dioxinům, v toxických ekvivalentech (TEQ) 2,3,7,8-TCDD
(viz. Tabulka Světové zdravotnické organizace).
Koncentrace jednotlivých látek v daném vzorku se násobí jejich příslušným
TEF a tyto násobky se následně sčítají, aby se dospělo k celkové koncentraci dioxinům
podobných sloučenin, vyjádřených v TEQ.
Koncepce "horní hranice" vyžaduje, aby se do celkové hodnoty TEQ započítaly
mezní hodnoty kvantifikace každého nekvantifikovaného kongeneru.
Koncepce "dolní hranice" vyžaduje, aby se do celkové hodnoty TEQ započítala
za každý nekvantifikovaný kongener nulová hodnota.
Koncepce "střední hodnoty" vyžaduje, aby se do celkové hodnoty TEQ započítala
polovina mezní hodnoty kvantifikace pro každý nekvantifikovaný kongener.
3.
Příprava vzorků
Pro přípravu vzorků k laboratornímu zkoušení jsou použitelné postupy
uvedené v příloze č. 7 této vyhlášky. Kromě toho musí být splněny tyto požadavky:
- vzorky musí být skladovány a přepravovány ve skleněných, hliníkových,
polypropylénových nebo polyethylenových nádobách. Z nádoby na vzorky musí být odstraněny
stopy papírového prachu. Skleněné nádobí musí být vypláchnuto rozpouštědly předem
zkontrolovanými z hlediska přítomnosti dioxinů,
- musí být provedena slepá zkouška, která spočívá v provedení celého
analytického postupu s vynecháním vzorku,
- hmotnost vzorku použitá k extrakci musí být dostatečná vzhledem k citlivosti.
4.
Požadavky kladené na laboratoře
- laboratoře musí prokázat účinnost metody v rozsahu koncentrace, která
je předmětem zájmu, například polovina, jedno a dvojnásobek koncentrace, která je
předmětem zájmu, s přijatelným variačním koeficientem výsledků opakované analýzy.
Podrobnosti kritérií přijatelnosti viz bod 5;
- mezní hodnota stanovitelnosti pro ověřovací metodu musí být v rozsahu
asi jedné pětiny úrovně, která je předmětem zájmu, aby byla jistota, že v rozsahu
úrovně, která je předmětem zájmu, se dosahuje přijatelných variačních koeficientů;
- jako opatření v rámci vnitřní kontroly jakosti se provádějí pravidelné
slepé zkoušky, stanovení se standardním přídavkem nebo stanovení kontrolních vzorků
(nejlépe certifikovaného referenčního materiálu, je-li k dispozici);
- úspěšná účast v mezilaboratorních studiích, které hodnotí způsobilost
laboratoře, je nejlepším způsobem, jak prokázat schopnost provádět určitá stanovení.
Avšak úspěšná účast v mezilaboratorních studiích, například pro půdní vzorky nebo
vzorky odpadních vod, nezbytně neprokazuje též schopnost v oblasti vzorků potravin
nebo krmiv, kde jde o nižší úrovně znečištění. Proto je povinná trvalá účast v mezilaboratorních
studiích stanovení dioxinů a dioxinům podobných PCB v příslušných matricích krmiv/potravin;
- laboratoře musí být akreditovány uznávaným subjektem působícím v souladu
s ISO Guide 58, aby bylo zajištěno, že uplatňují zabezpečování jakosti při analýzách.
Laboratoře by měly být akreditovány podle normy ISO/IEC 17025:1999.
5.
Požadavky kladené na analytické metody zkoušení dioxinů a dioxinům podobných
PCB
Základní požadavky pro uznání analytických metod:
- vysoká citlivost a nízké mezní hodnoty detekce. Pro PCDD a PCDF musí
být detekovatelná množství v řádu pikogramů TEQ (10E-12 g) kvůli mimořádné toxicitě
některých z těchto sloučenin. Je známo, že PCB se vyskytují ve vyšších koncentracích
než PCDD a PCDF. Pro většinu kongenerů PCB již postačuje citlivost v řádu nanogramů
(10E-9 g). Avšak pro měření jedovatějších dioxinům podobných kongenerů PCB (zejména
non-ortho substituovaných forem) musí být dosaženo stejné citlivosti jako pro PCDD
a PCDF;
- vysoká selektivita. Je nutné rozlišovat PCDD, PCDF a dioxinům podobné
PCB od velkého množství jiných, společně extrahovaných a eventuálně rušivých sloučenin
přítomných v koncentracích až o několik řádů vyšších než koncentrace látek, které
jsou předmětem zájmu. Pro plynovou chromatografii s hmotnostní spektrometrií (GC/MS)
je nezbytné rozlišení mezi různými kongenery, tj. mezi toxickými (např. sedmnáct
2,3,7,8-substituovaných PCDD a PCDF a dioxinům podobných PCB) a ostatními kongenery.
Biologické zkoušky sloučenin musí být schopny selektivně určit hodnoty TEQ jako součet
PCDD, PCDF a dioxinům podobných PCB;
- vysoká přesnost (správnost a shodnost). Stanovení musí poskytovat platný
a spolehlivý odhad skutečné koncentrace ve vzorku. Je nezbytná vysoká přesnost (přesnost
měření: velká shoda výsledku měření a skutečné nebo přisuzované hodnoty měření),
aby se předešlo zamítnutí analýzy vzorku na základě špatné spolehlivosti odhadu TEQ.
Přesnost se vyjadřuje jako správnost (rozdíl mezi střední naměřenou hodnotou analytu
v certifikovaném referenčním materiálu a jeho certifikovanou hodnotou, vyjádřený
jako procento této hodnoty) a shodnost (shodnost se obvykle počítá jako standardní
odchylka zahrnující opakovatelnost a reprodukovatelnost a označuje míru shody mezi
výsledky získanými několikanásobným použitím experimentálního postupu za předepsaných
podmínek).
Vyhledávací metody mohou zahrnovat metody biologických zkoušek a metody
GC/MS; ověřovací metody jsou metody plynové chromatografie s vysokým rozlišením/hmotnostní
spektrometrie s vysokým rozlišením (HRGC/HRMS). Celková hodnota TEQ musí vyhovovat
těmto kritériím
-----------------------------------------------------------------------------
Vyhledávací metody Ověřovací metody
-----------------------------------------------------------------------------
Falešně negativní koncentrace < 1 %
-----------------------------------------------------------------------------
Správnost - 20 až + 20 %
-----------------------------------------------------------------------------
Variační koeficient < 30 % < 15 %
-----------------------------------------------------------------------------
6.
Zvláštní požadavky, které musí splňovat metody GC/MS, aby vyhovovaly pro
účely vyhledávání nebo ověřování
- při validaci metody musí být hned na počátku analytické metody, například
před extrakcí, provedeno přidání vnitřních standardů 2,3,7,8-chlór substituovaných
PCDD/F značených pomocí 13C (a vnitřních standardů dioxinům podobných PCB značených
pomocí 13C, pokud musí být určeny dioxinům podobné PCB). Alespoň jeden kongener musí
být přidán pro každou z tetra nebo okta-chlorovaných homologických skupin PCDD/F
(a alespoň jeden kongener pro každou z homologických skupin dioxinům podobných PCB,
pokud musí být určeny dioxinům podobné PCB) (nebo alespoň jeden kongener pro každou
skupinu vybraných iontů při použití hmotnostní spektrometrie v režimu registrace
vybraných iontů, použitou pro sledování PCDD/F a dioxinům podobných PCB). Jednoznačně
se dává přednost, zejména v případě ověřovacích metod, použití všech 17 vnitřních
standardů 2,3,7,8-substituovaných PCDD/F značených pomocí 13C a všech 12 vnitřních
standardů dioxinům podobných PCB značených pomocí 13C (pokud musí být určeny dioxinům
podobné PCB).
Pro ty kongenery, k nimž není přidán žádný analog značený pomocí 13C,
se určí relativní koeficienty odezvy při použití vhodných kalibračních roztoků.
- Pro krmiva rostlinného původu a krmiva živočišného původu obsahující
méně než 10 % tuku je přidání vnitřních standardů před extrakcí povinné. Pro krmiva
živočišného původu obsahující více než 10 % tuku se vnitřní standardy přidávají buď
před, nebo po extrakci tuku. Vhodná validace účinnosti extrakce se provádí v závislosti
na tom, kdy je vnitřní standard přidáván a na tom, zda jsou výsledky uváděny v produktu
nebo v tuku.
- Před analýzou GC/MS musí být přidán jeden nebo dva standardy pro stanovení
výtěžnosti.
- Kontrola výtěžnosti je nezbytná. U ověřovacích metod se výtěžnost jednotlivých
vnitřních standardů pohybuje v rozsahu 60 až 120 %. Nižší nebo vyšší hodnota výtěžnosti
jednotlivých kongenerů, zejména některých hepta- a okta-chlorovaných dibenzodioxinů
a dibenzofuranů, je přípustná pod podmínkou, že jejich příspěvek k hodnotě TEQ nepřesáhne
10 % celkové hodnoty TEQ (jen na základě PCDD/F). Hodnota výtěžnosti u vyhledávacích
metod se pohybuje mezi 30 a 140 %.
- Oddělení dioxinů od rušivých chlorovaných sloučenin, jako jsou PCB
a chlorované difenylethery, se provádí vhodnými chromatografickými technikami (nejlépe
na florisilové, aluminové a/nebo uhlíkové koloně).
- Oddělení isomerů pomocí plynové chromatografie musí být dostatečné
(< 25 % mezi píky 1,2,3,4,7,8-HxCDF a 1,2,3,6,7,8-HxCDF).
- Stanovení se provádí podle metody EPA 1613 revize B: tetra- až okta-chlorované
dioxiny a furany pomocí izotopického zřeďování HRGC/HRMS nebo jinou metodou se shodnými
pracovními charakteristikami (performance criteria).
- U krmiv kontaminovaných dioxiny v rozsahu maximální úrovně nebo nad
ní by rozdíl mezi horní a dolní mezní úrovní neměl překročit 20 %. U krmiv s úrovní
kontaminace výrazně pod maximální úrovní se může rozdíl pohybovat v rozmezí 25 a
40 %.
7.
Vyhledávací analytické metody
7.1 Úvod
Vyhledávací metody mohou být použity k různým přístupům: čistě
vyhledávací přístup a nebo kvantitativní přístup.
Vyhledávací přístup
Odezva vzorků
se porovnává s odezvou srovnávacího vzorku na úrovni, která je předmětem zájmu. Vzorky
s odezvou nižší než srovnávací vzorek se považují za negativní, vzorky s vyšší odezvou
se považují za pozitivní. Požadavky:
- do každé zkušební série se zařazují alespoň
jeden slepý a jeden srovnávací vzorek, které se extrahují a zkouší současně za shodných
podmínek. Odezva srovnávacího vzorku musí být zřetelně vyšší ve srovnání se slepým
vzorkem,
- zařazují se další srovnávací vzorky s poloviční a dvojnásobnou koncentrací,
která je předmětem zájmu, aby se prokázala řádná účinnost zkoušky pro kontrolu koncentrace,
která je předmětem zájmu,
- při zkoušení jiných matric se musí prokázat vhodnost referenčního
vzorku(ů), nejlépe zařazením vzorků, u nichž bylo pomocí HRGC/HRMS zjištěno, že obsahují
množství TEQ přibližně odpovídající referenčnímu vzorku nebo jinému slepému vzorku
obohacenému na tuto úroveň,
- protože při biologických zkouškách sloučenin nemohou
být použity žádné vnitřní standardy, jsou pro získání informací o standardní odchylce
v rámci jedné zkušební série velmi důležité testy opakovatelnosti. Variační koeficient
musí být nižší než 30 %,
- pro biologické zkoušky jsou definovány cílové (stanovované)
sloučeniny, možné rušivé vlivy a maximální přípustné slepé hodnoty.
Kvantitativní
přístup
Kvantitativní přístup vyžaduje standardní sérii ředění, dvojnásobné nebo trojnásobné
čištění a měření, jakož i slepé stanovení a kontrolu výtěžnosti. Výsledek se vyjadřuje
jako TEQ, čímž se předpokládá, že sloučeniny odpovědné za signál odpovídají principu
TEQ. Toto může být provedeno pomocí TCDD (nebo standardní dioxin/furanové směsi)
za účelem vytvoření kalibrační křivky pro výpočet hodnoty TEQ v extraktu a tedy i
vzorku. Tato hodnota se následně koriguje podle hodnoty TEQ vypočtené pro slepý vzorek
(aby se zohlednily nečistoty z použitých rozpouštědel a chemikálií) a výtěžnost (vypočtená
z hodnoty TEQ ve vzorku pro kontrolu jakosti v blízkosti mezní koncentrace, která
je předmětem zájmu). Je nezbytné poznamenat, že část zřejmé ztráty výtěžnosti může
být způsobena matricovými jevy a/nebo rozdíly mezi hodnotami TEF v biologických zkouškách
sloučenin a úředními hodnotami TEF stanovenými WHO.
7.2. Požadavky kladené na analytické metody používané pro vyhledávání
-
pro vyhledávání se používají analytické metody GC/MS a biologické metody zkoušení.
Pro metody GC/MS se uplatňují požadavky stanovené v bodu 6. Pro buněčné biologické
zkoušky sloučenin platí zvláštní požadavky stanovené v bodu 7.3. a pro biologické
zkoušky sloučenin prováděné pomocí setů platí zvláštní požadavky stanovené v bodu
7.4.;
- jsou nezbytné informace o počtu falešně pozitivních a falešně negativních
výsledků velkého souboru vzorků pod a nad maximální úrovní nebo účinnou úrovní ve
srovnání s obsahem TEQ určeným ověřovací analytickou metodou. Skutečný podíl falešně
negativních výsledků musí být nižší než 1 %. Podíl falešných pozitivních výsledků
musí být natolik nízký, aby se použití vyhledávacího nástroje stalo výhodným;
- pozitivní
výsledky musí být vždy potvrzeny ověřovací analytickou metodou (HRGC/HRMS). Kromě
toho se pomocí HRGC/HRMS potvrzují vzorky z širokého rozmezí hodnot TEQ (přibližně
2 až 10 % negativních vzorků) a předkládají se informace o souladu výsledků biologické
zkoušky a HRGC/HRMS.
7.3. Zvláštní požadavky kladené na biologické zkoušky sloučenin
- při biologickém zkoušení vyžaduje každá zkouška řadu srovnávacích
koncentrací TCDD nebo dioxin/furanových směsí (úplná křivka/odezva s RE2 > 0,95).
Avšak pro účely vyhledávání se používá rozšířená nízkoúrovňová křivka pro analyzování
vzorků s nízkým obsahem;
- aby bylo výsledku biologické zkoušky sloučenin dosaženo během konstantní
doby, používá se srovnávací koncentrace TCDD (asi trojnásobek meze detekce) uvedená
na listu kontroly jakosti. Jinou možností je relativní odezva srovnávacího vzorku
vztažená ke kalibrační křivce TCDD, protože odezva buněk může záviset na mnoha faktorech;
- pro každý srovnávací materiál se zaznamenávají a kontrolují grafy
kontroly jakosti, aby byl zajištěn soulad výsledku se směrnicemi;
- zejména v případě kvantitativního vyhodnocování musí být výsledek
ředění vzorků uvnitř lineární části úseku křivky odezvy. Vzorky nad lineární částí
křivky odezvy musí být znovu zředěny a přezkoušeny. Proto se doporučuje zkoušet alespoň
tři nebo více různě ředěných vzorků najednou;
- variační koeficient nesmí být vyšší než 15 % při trojnásobném stanovení
pro každé ředění vzorku a pro tři nezávislé pokusy by neměl přesáhnout 30 %;
- mezní hodnota detekce se stanovuje jako trojnásobek směrodatné odchylky
slepého pokusu s rozpouštědlem nebo z odezvy pozadí. Dalším přístupem je použití
odezvy, která je nad pozadím (indukční koeficient rovnající se pětinásobku slepého
pokusu s rozpouštědlem) vypočteným z kalibrační křivky dne. Mez stanovitelnosti se
stanovuje jako pětinásobek standardní odchylky odezvy slepého pokusu s rozpouštědlem
nebo pozadí nebo pomocí odezvy, která je jasně nad pozadím (indukční koeficient rovnající
se desetinásobku odezvy slepého rozpouštědla) vypočteným z kalibrační křivky dne.
7.4. Zvláštní požadavky kladené na biologické zkoušky sloučenin prováděné
pomocí souprav (kitů)
Poznámka: Dosud nebyly předloženy žádné důkazy o tom, že komerčně
dostupné biologické zkoušky sloučenin prováděné pomocí souprav jsou dostatečně citlivé
a spolehlivé na to, aby mohly být používány k vyhledávacímu zjišťování přítomnosti
dioxinů v požadovaných koncentracích ve vzorcích potravin a krmiv.
- musí být dodržovány
pokyny výrobce pro přípravu vzorků,
- nepoužívají se zkušební soupravy po uplynutí
doby použitelnosti,
- nepoužívají materiály a součásti navržené pro použití s jinými
soupravami,
- zkušební soupravy se uchovávají v předepsaném rozsahu skladovacích teplot
a používají se při předepsané provozní teplotě,
- mezní hodnota detekce pro imunologickou
zkoušku se určuje jako součet střední hodnoty a trojnásobku standardní odchylky,
vycházejících z deseti opakovaných analýz slepého vzorku, jenž se dělí směrnicí přímky,
získané lineární regresí;
- pro zkoušky v laboratořích se doporučuje požívat srovnávací
standardy, aby byla jistota, že citlivost standardu je v přijatelném rozsahu.
8.
Oznamování výsledků
Pokud to používaný analytický postup umožňuje, analytické výsledky uvádí
množství jednotlivých kongenerů PCDD/F a PCB jako dolní, horní a střední odhady,
aby oznamované výsledky obsahovaly maximum informací. Dále se uvádí také obsah lipidů
ve vzorku a metoda použitá pro extrakci lipidů.
Výtěžnost vnitřních standardů se uvádí, pokud jsou výsledky mimo povolený
rozsah maximálních hodnot uvedených v bodu 6 a v ostatních případech na vyžádání.
Část 3:
Souvislosti
Pouze pro účely této vyhlášky je schválenou specifickou mezí kvantifikace
jednotlivého kongeneru koncentrace analytu v extraktu vzorku, jenž vytváří instrumentální
odezvu na dva různé ionty, která má být monitorována v poměru signál - šum 3 : 1
pro méně citlivé signály a při splnění základních požadavků, jako je např. retenční
čas, poměr izotopu podle postupu určení popsaného v metodě EPA 1613 revize B.